这个网站使用饼干,标签和跟踪设置要存储帮助您提供最佳浏览体验的信息。 把这个警告

植物的再生虹膜蠊通过改进的体细胞胚胎发生协议从茎尖获得L.

HortScience
查看更多 视图少
  • 1 江苏省中国科学院植物研究所,江苏南京210014
  • |2 江西财经大学风景园林系江西省生态环境实验教学中心,江西南昌330032
  • |3. 江苏省中国科学院植物研究所,江苏南京210014

一个改进的三阶段方案,通过体细胞胚胎发生的植物再生的重要园艺植物虹膜蠊以茎尖段为外植体培养出L.;在试验的第一阶段,60%的愈伤组织从茎尖部分我下。在Murashige和Skoog (MS)培养基中添加4.52 μ2,4-二氯苯氧乙酸(2,4- d)和0.44 μ6-苄基腺嘌呤(6-BA)。当在MS培养基上传代培养Nonembryogenic Calli时,带11.31μm2,4- d和0.44 μ6-BA,胚性愈伤组织发生频率最高(66.0%)。第二阶段,9% (w/v)蔗糖处理的体细胞胚(SE)最适形成率为70.0%。在第3阶段,有90.0%以上的SEs在无生长调节剂MS培养基上以双极结构萌发并再生成植株。再生植株在温室环境中驯化成功,体细胞无性系变异小。组织学研究表明,胚性愈伤组织的体细胞胚发生阶段是不同步的,SEs从胚性愈伤组织的表面和内部组织发育而来。

摘要

一个改进的三阶段方案,通过体细胞胚胎发生的植物再生的重要园艺植物虹膜蠊以茎尖段为外植体培养出L.;在试验的第一阶段,60%的愈伤组织从茎尖部分我下。在Murashige和Skoog (MS)培养基中添加4.52 μ2,4-二氯苯氧乙酸(2,4- d)和0.44 μ6-苄基腺嘌呤(6-BA)。当在MS培养基上传代培养Nonembryogenic Calli时,带11.31μm2,4- d和0.44 μ6-BA,胚性愈伤组织发生频率最高(66.0%)。第二阶段,9% (w/v)蔗糖处理的体细胞胚(SE)最适形成率为70.0%。在第3阶段,有90.0%以上的SEs在无生长调节剂MS培养基上以双极结构萌发并再生成植株。再生植株在温室环境中驯化成功,体细胞无性系变异小。组织学研究表明,胚性愈伤组织的体细胞胚发生阶段是不同步的,SEs从胚性愈伤组织的表面和内部组织发育而来。

虹膜L.,属于家庭鸢尾科,包括300多种多年生草本植物。这些植物常被用作园林观赏植物和重金属植物修复(Han et al., 2013黄等,2003a2011年Kim等人,2009年).我下。鸢尾被认为是园艺上最重要的高须鸢尾之一,自古以来就有数百个具有商业价值的栽培品种(黄等,2003bJeknic等人,1999年).此外,一些根状茎我下。品种中含有一种部分由铁酮组成的精油(Jehan等人,1994).这些紫罗兰香味的酮类化合物经常用于化妆品和香水(Gozu等人,1993).

培养我下。有限,无法满足日益增长的原材料需求。虽然I. Germinica传统上是通过根茎分裂或种子繁殖,这些方法不能有效地产生足够的幼苗(Jehan等人,1994特里夏1932).此外,虹膜品种间高度不亲和(Jeknic等人,1999年).

体细胞胚胎发生是植物再生最快的系统,通常被认为是遗传转化的先决条件(Jeknic等人,1999年Karami等人。,2006年).因此,通过不同外植体类型的体细胞胚胎发生来进行虹膜再生的方案已经形成(Jevremović和Radojević, 2006Kim等人,2009年劳布林等人,1991年Radojević等,1987Radojević和Subotić, 1992Shibli和Ajlouni, 2000年),包括我下。由叶基部,顶端,萼片,花瓣和子房再生的(Jehan等人,1994).Jehan et al. (1994)结果表明,获得胚性愈伤组织的最佳培养基为添加2.9 g/L脯氨酸的MS培养基。胚性愈伤组织诱导率为10%,胚转化率为95%。因此,脯氨酸对胚性愈伤组织的改良效率较低我下。以及植物再生的那种虹膜物种已阻碍了适宜的转化体系的建立(Jeknic等人,1999年).到目前为止,以体细胞胚胎发生为基础的再生系统的遗传转化还不存在虹膜物种。因此,寻找提高胚性愈伤组织产生和植株再生的方法势在必行。

体细胞胚胎发生还为植物胚胎发育中早期事件的研究提供了一种模型系统(齐默尔曼,1993).在单子叶植物中,胚的形态因种而异,特别是子叶也称为盾片(哈特曼等人,1997年).然而,关于SEs的形态学或组织学改变的详细信息我下。尚未报道。

本研究的主要目的是通过体细胞胚发生建立高效的植物再生体系我下。研究了茎尖上的SEs的形态和组织学变化。

材料和方法

植物材料。

的幼苗我下。“印度Chief”是在植物研究所的鸢尾种质资源苗圃种植和保存的,江苏省和中国科学院(32°30 ' N和118°E)。苗端片段2植物收集与运行自来水冲洗1 h。然后他们被表面消毒75% (v / v)乙醇45年代,0.1% (w / v)氯化汞10分钟,其次是六用无菌蒸馏水冲洗。

胚胎发生的愈伤组织诱导。

将枝条切成薄薄的薄层,长度为≈2mm的薄层,并置于MS培养基上(Murashige和Skoog, 1962年)补充有不同浓度的2,4-D(2.26,4.52,6.78或9.04μ)和0.44μ6-BA。所有培养基均添加3% (w/v)蔗糖和0.6% (w/v)琼脂(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO)。用1n NaOH或HCl调整pH至5.8,然后在121°C下蒸压20分钟。所有实验都在6 × 6 cm的烧瓶中进行,每个烧瓶中含有40 mL培养基。所有培养物均置于生长室25°C黑暗中培养。培养8周后测定愈伤组织和胚性愈伤组织的诱导频率。

为了提高胚性愈伤组织的形成频率,将非胚性愈伤组织在添加不同浓度2,4- d (2.26, 6.78, 11.31, 15.84 μ)的MS培养基上进行继代培养),0.44μmba和3%(w / v)蔗糖。将所有培养物在25℃下在25℃下在40μmol·m下在25℃下孵育所有培养物−2·年代−1冷白色荧光灯。培养4周后评估胚性愈伤组织形成的频率。

体细胞胚诱导。

为了评估蔗糖浓度对SE诱导的影响,将胚性愈伤组织转移到含1.5%、3%、6%和9%蔗糖的无pgr MS培养基中。所有培养物在12光周期下培养。如上所述,培养8周后记录SE形成的频率。

发芽和植株再生。

将se相互分离,转移到含3%蔗糖的半强或全强MS培养基上进行萌发和植株再生。所有培养物在12光周期下培养。培养2周后记录胚萌发频率。培养5周后测定胚转化频率和株高。

适应环境。

用行驶自来水洗涤具有发育良好的根和叶子的小植物,以除去培养基并转移到含有花园土壤,泥炭和珍珠岩的混合物(1:1:1,v的塑料罐(30cm×30cm)中/ v / v)。种植后,它们被遮阳净切割90%的温室条件下的光线,并每周两次灌溉两次自来水。在转移后8周记录出植物的频率存活。

组织学检查。

为了研究胚胎源细胞的组织化和开发,在FAA溶液中固定胚胎愈伤组织和SES(甲醛:乙酸:乙醇,1:1:18,v / v / v),通过梯度乙醇脱水系列并嵌入石蜡蜡中。通过旋转的显微电火车切割10μm厚的部分,用Safranin-Fast Green染色并在光学显微镜下观察(尼康Eclipse 50i)。

统计分析。

所有实验间隔2周重复1次。每个实验处理包含5个外植体,每个处理5个外植体。数据采用单因素方差分析(ANOVA)进行分析,处理方法采用Ducan的多范围检验(P< 0.05)。用百分比表示的数据之前是根据arcsin (x/100)转换的。0.5

结果

愈伤组织诱导。

2,4-D对培养后8周愈伤组织的形成频率有显著影响。在不同培养基中,外植体培养在μ 4.522,4- d的愈伤组织形成率最高,为60.0% (表1).同时,根据纹理可以区分两种类型的愈伤组织。一种是最常见的诱导型,外观柔软,呈胶状,被认为是非胚性愈伤组织(图1一个).被认为是胚性愈伤组织的另一种类型呈现易碎和结节性结构(图1 b).仅诱导出少量胚性愈伤组织,最大诱导率为20.0%,各诱导处理间无显著差异(表1).

表1。

2,4-二氯氧乙酸(2,4- d)对愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响虹膜蠊

表1。
图1所示。
图1所示。

茎尖的体细胞胚发生虹膜蠊.(一个非胚性愈伤组织在MS + 2.26 μ2,4 - d。(B胚性愈伤组织在MS + 11.31 μ2,4 - d。(C)在无pgr的MS培养基(含3%蔗糖)上诱导黄芩胚期(箭头)。(D鳞片状胚胎簇。(E初生根在MS培养基(箭头)上从胚根发育而来。(F胚芽鞘在另一个星期内发育(箭头)。(G)叶子从胚芽鞘(箭头)中出现。(H)具有发育良好的叶和根的再生植株。(温室里驯化的植株。MS = Murashige and Skoog 's;2,4-d = 2,4-二氯氧乙酸;植物生长调节剂;S =角质鳞片;R =根;Cp = cleoptile;L =叶。棒= A-G = 1 mm;H-I = 1 cm。

引用本文:HortScience horts 507;10.21273 / HORTSCI.50.7.1045

胚胎发生的愈伤组织转换。

非胚性愈伤组织继代培养在不同浓度2,4- d (2.26, 6.78, 11.31, 15.84 μ .)的MS培养基上),在2周的培养期内开始转化为胚性愈伤组织。随着2,4- d浓度增加至11.31 μ,胚性愈伤组织诱导频率显著增加表2).但是,浓度较高2,4-D(15.84μ)对胚性愈伤组织转化有抑制作用,其频率降低到40.0%。

表2。

2,4-二氯氧乙酸(2,4- d)对青花苜蓿胚性愈伤组织转化的影响虹膜蠊

表2。

SE归纳。

将胚性愈伤组织转移到含不同蔗糖浓度(1.5%、3%、6%、9%)的无pgr MS培养基中,培养8周后,SEs在外植体表面诱导发育为黄体期(图1 c).所有盾片呈不透明白色,呈簇状(图1 d).不同蔗糖浓度间硒的形成存在显著差异。在含1.5%蔗糖(表3).一些胚性愈伤组织甚至转变为非胚性愈伤组织或坏死。蔗糖浓度为9%时,SE的形成率最高,为70.0%。

表3。

蔗糖浓度对马铃薯体胚诱导的影响虹膜蠊

表3。

SEs的萌发。

将分离的胚转移到半强度或全强度MS培养基中,培养后1周内,胚开始萌发,由胚根形成初生根(图1 e).然后在接下来的一周内开发的绿色植物植物(图1 f).因此,萌发胚呈双极结构,无论培养基(图2一个).

图2所示。
图2所示。

培养基对细胞胚胎萌发和转化的影响(一个)及植株的生长(B)虹膜蠊.竖条表示平均值的标准误差。不同字母表示邓肯多重范围测验有显著差异(P< 0.05);n=每外植体50块。

引用本文:HortScience horts 507;10.21273 / HORTSCI.50.7.1045

植物再生。

培养5周后,初生叶从胚芽鞘(图1克).SEs在两种培养基上转化成根和叶发育良好的植株(图1 h).与半强度MS培养基相比,全强度MS培养基的转化率显著提高至92.5% (图2 b).根的平均长度在全强度MS培养基上也显著增加,而枝的平均长度在两种处理之间没有差异(图2 b).因此,全强度MS培养基是黄芪幼苗生长的较好选择我下。.转化苗在温室人工土壤中驯化8周后的成活率为60.0%。再生植株与自然生长植株之间未观察到表型变异(图1我).

体细胞胚的组织结构。

胚性愈伤组织细胞胞质致密,细胞核突出,分生组织活性强(图3).随着培养的进行,胚性愈伤组织表面出现突起,表明SEs (图3 b).体细胞胚胎发生阶段是异步的,SEs的球形和鱼雷阶段同时形成(图3C和D).SES还可以从胚胎源性愈伤组织的内组织发展(图3E和F).在胚胎的鱼雷阶段没有观察到血管连接(图3D和F).

图3所示。
图3所示。

胚性愈伤组织和体细胞胚的组织学切片虹膜蠊.(一个)胚性愈伤组织细胞,细胞质致密,细胞核明显(箭头)。(B)胚性愈伤组织(箭头)上的突起。(C)胚性愈伤组织表面发育球状体胚(箭头)。(D鱼雷体细胞胚发育于胚性愈伤组织表面。(E)胚性愈伤组织内部组织发育的球状体胚(箭头)。(F鱼雷体细胞胚由胚性愈伤组织内部组织发育而来(箭头)。Ec =胚性愈伤组织;Ge =球形胚;P =突起;鱼雷胚胎。柱= 100 μm。

引用本文:HortScience horts 507;10.21273 / HORTSCI.50.7.1045

讨论

虽然再生协议我下。体细胞胚发生的研究以前曾有过报道,但由于脯氨酸诱导胚性愈伤组织的效率较低(Jehan等人,1994).本研究发现,在培养基中添加2,4- d可显著促进胚性愈伤组织的形成。2,4- d是一种生长素,在许多植物中被认为可以促进体细胞胚胎发生(Bano等人,1991年Chen et al., 2014Jevremović和Radojević, 2006Kim等人,2009年劳布林等人,1991年Limanton-Grevet和Jullien,2000Manrique-Trujillo等人,2013年普拉多和贝维尔,1990年加拿大,1990).在某些物种中,2,4- d不仅能诱导体细胞胚胎发生,而且还能促进体细胞胚的成熟向日葵”普拉多和贝维尔,1990年),芦笋officinalis.Limanton-Grevet和Jullien,2000),云杉glauca加拿大,1990),缬草jatamansiChen et al., 2014).而在本研究中,2,4- d在体细胞胚诱导期有效,但不能刺激胚胎进一步生长。在我们的初步实验中,在含2,4- d(数据未显示)的培养基上,随着培养时间的延长,胚变得肿胀,不能相互分离,也不能转化成植株。类似的观察结果在即pseudacorusKim等人,2009年).因此,可以表明胚胎成熟需要2,4- in的去除我下。.类似的结果已经在即pumilaJevremović和Radojević, 2006),即pseudacorusKim等人,2009年).

蔗糖是植物组织培养中最常用的碳水化合物来源之一,已知在SE的形成和成熟中发挥关键作用(富恩特斯等,2000年).结果表明,在0.2 M (6%, w/v)蔗糖条件下,胚数最多I. Nigricans.Shibli和Ajlouni, 2000年).与此同时,Kim等人(2009)发现0.22米蔗糖(6.6%,W / V)诱导SES的最高频率即pseudacorus.在本研究中,SEs的形成频率随蔗糖浓度的增加而增加。在其他植物品种(Karami等人。,2006年卢等人,1996年中川等人,2001年).据报道,在体细胞胚胎发生过程中,蔗糖不仅可以作为碳源,还可以作为渗透调节剂(Biahoua和Bonneau, 1999绞合线,1986).通常已知高糖浓度可能影响细胞胚胎发生中的细胞渗透压。因此,可以提出该研究中的高蔗糖浓度可能充当营养和调节渗透性。还应注意,1.5%(w / v)蔗糖抑制具有异常胚胎的SES的形成,这与报告的观察结果一致Dianthus Caryophyllus.Karami等人。,2006年).因此,这也说明蔗糖的渗透作用对SEs的正常发育是必需的。

根的产生对植物的再生极其重要我下。.在本研究中,胚在无pgr再生培养基上萌发,形成双极结构的初生根,这与许多研究结果一致虹膜物种 (Kim等人,2009年Radojević等,1987鲁瑟,1977).然而,劳布林等人(1991)证明了SES即pseudacorus即setosa,一、多色的尽管存在明确定义的根业证,但除非它们转移到吲哚-3-丁二酸(IBA)介质中,否则没有形成根。因此,可以建议生根问题虹膜通过将成熟胚转入无pgr培养基或添加IBA培养基均可克服种。

研究植物再生的培养基,Kim等人(2009)在各种培养基上培养胚胎,揭示了半强度MS培养基是植物生长最有效的即pseudacorus.在本研究中,在半强MS培养基中,植株的茎长和根长均最长。而在本研究中,全强度MS培养基植株再生效果较好,植株转化率较高,根长较长。

组织学研究表明,SEs可以从胚性愈伤组织的表面和内部组织发育。这是第一次报道该属的SEs的组织学特征虹膜组织学研究还表明,体细胞胚胎发生的阶段是不同步的。类似的观察结果在即pumilaJevremović和Radojević, 2006),d . caryophyllusKarami等人。,2006年).脱落酸(ABA)可以促进SEs (Ammirato 1974).Kim等人(2009)在添加不同浓度ABA的培养基上培养球形SEs,发现其胚成熟无显著差异即pseudacorus.ABA是否能促进硒的同步发展我下。需要进一步调查。

综上所述,2,4- d对胚性愈伤组织的诱导具有一定的控制作用,而SE的形成则依赖于高蔗糖浓度。因此,体细胞胚发生是一种有效的植物再生方法我下。已建立,可用于近繁和遗传转化。由于再生植株一般需要2年虹膜种到花,有关花的表型变异性的数据是没有的,将在稍后评估。

文献引用

  • Ammirato,P.V.1974脱落酸对香菜体细胞胚发育的影响Carum carvil .)机器人。Gaz。135328337

  • Bano,Z。Rajarathnam,年代。莫汉蒂,最初1991茶树子叶培养的体细胞胚胎发生(制成l .)j .长的矮。科学。66465470

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Biahoua,一个。邦,l1999的控制在体外梭形树的体细胞胚胎发生(卫矛europaeusL.)通过糖型和培养基的渗透潜力植物细胞Rpt。19185190

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 陈,R。张,M。陆,J。张,X。达席尔瓦,J.A.T.嘛,G。2014年叶外植体的茎器官发生和体胚发生缬草jatamansi琼斯科学。长的矮。165392397

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 富恩特斯,狭义相对论卡列罗斯,M.B.Manetti-Filho,J。维埃拉,低速齿轮2000年硝酸银和不同碳水化合物来源对紫花苜蓿体细胞胚胎发生的影响Coffea Canephora.植物细胞组织器官邪教。60513

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Gozu,Y。YokoyamaM。Nakamura,M。Namba,R。Yomogida,K。昭,M。Nakamura,年代。1993离体繁殖虹膜pallida植物细胞代表。131216

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 汉,Y.L.黄,S.Z.元,H.Y.赵,J.Z.顾,j。2013年有机酸对生长,解剖结构,生化参数和重金属积累虹膜lacteavar。在Pb矿尾矿中生长幼苗生态毒理学2210331042

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 哈特曼,高强度科斯特,D.E.戴维斯J.F.T.日内瓦,R.L.1997植物繁殖、原理与实践。第六版,普伦蒂斯霍尔,新泽西州

  • 黄,S.Z.汉,Y.L.谢,'郭先生,波长计顾,Y。2003年,一个中国观赏鸢尾资源的研究与开发中国野生植物资源2247(在中国)

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 黄,S.Z.汉,Y.L.俞,S.L.顾,j。张,l。2011年铅、铜对水花生长及生理反应的影响虹膜pseudacorusl费森尤斯公司环境。小羊。20.2246.2250.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 黄,S.Z.汉,Y.L.张,Y.G.郭先生,波长计2003 b矮生植物的培育虹膜蠊l通过杂交j .南京Agr。大学。262125(在中国)

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 接过话头,H。礼貌的,D。Ehret,C。我们针对,K。Petiard,V。1994植物的再生虹膜pallida林。和虹膜蠊叶片、顶端和幼花的体细胞胚发生植物细胞Rpt。13671675

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Jeknic,Z。李,……戴维斯J。恩斯特,陈,T.H.1999遗传转化的虹膜蠊根癌土壤杆菌j·阿。Soc。长的矮。科学。124575580

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Jevremović,年代。Radojević,剩下2006年高效叶片外植体再生方案的建立虹膜pumila芽培养在体外科学。长的矮。108One hundred.103

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Karami,O。Deljou,一个。Esna-Ashari,M。Ostad-Ahmadi,P。2006年蔗糖浓度对香石竹体胚发生的影响Dianthus Caryophyllus.l .)科学。长的矮。110340344

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 金,T.D.安,h英国宇航系统公司,K.H.Y.E.2009年体细胞胚发生过程中胚发生能力和形态的变化虹膜pseudacorus植物生物科技。RPT。3.251257

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Laublin,G。赛,H.S.卡帕多西亚,M。1991在体外一些根茎鸢尾根培养的体细胞胚胎发生再生植株植物细胞组织器官邪教。271521

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Limanton-Grevet,一个。Jullien,M。2000年体细胞胚胎发生在芦笋officinalis.可以是An.在体外选择过程导致习惯和2,4 - d依赖胚胎发生系植物杂志。物化学。38567576

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 绞合线,镭射气1986渗透胁迫对水稻体细胞胚胎发生的影响Carica悬挂的文化j·阿。Soc。长的矮。科学。111969972.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 卢,H。玉城丹尼,M。Kako,年代。1996蔗糖浓度的影响在体外培养黄瓜子叶外植体的形态发生j .长的矮。科学。71497502.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Manrique-Trujillo,年代。迪亚兹,D。Reano,R。芬兰,M。Kreuze,J。2013年通过改进的体细胞胚胎发生程序甘薯植株再生科学。长的矮。16195One hundred.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Murashige,T。斯,F。1962烟草组织培养快速生长和生物测定的修正培养基physiol。植物。15473497

  • 中川昭一,H。Saijyo,T。山内,N。Shigyo,M。Kako,年代。伊藤一个。2001年糖和脱落酸对甜瓜体细胞胚胎发生的影响Cucumis梅洛l .)扩大子叶科学。长的矮。908592

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 普拉多博物馆,E。Berville,一个。1990向日葵液体培养诱导体胚发育的研究(Helianthus Annuus.l .)植物科学。677382

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Radojević,剩下Sokić,O。Tucić,B。1987鸢尾组织培养的体细胞胚胎发生(虹膜pumilal .)Acta长的矮。212719.723.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Radojević,lsubotić,一个。1992植物的再生虹膜setosa棺罩。通过体细胞胚胎发生和器官发生j .植物杂志。139690696

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 鲁瑟,G。1977不同胚种为加顿胚种虹膜und.芦笋的误码率。Dtsch。机器人。全球经济。90417437

  • Shibli,R.A.ajlouni,M.M.2000年特有黑鸢尾的体细胞胚胎发生植物细胞组织器官邪教。611521

  • 特里夏M。1932研究细胞学和遗传学虹膜.éditiondu Bulletin Bioligique de la France et de la Belgique 66:255-444

  • 加拿大,F.M.1990从贮藏的种子中分离出的胚体胚胎发生和植株再生云杉glauca可以。j .机器人。68236242

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 齐默尔曼,评论1993体细胞胚胎发生:高等植物早期发育的一个模式植物细胞51411

贡献者笔记

国家自然科学基金资助项目(No. 31300436);江苏省农业科技支撑计划资助项目(No. 31300436);BE2012349)。

感谢卞桂兰在组织学研究中给予的宝贵帮助,感谢徐增来教授提供的显微镜。

重印要求应向谁提出;电子邮件hsz1959@163.com

  • Somatic embryogenesis from shoot apex segments of Iris germanica<\/em>. (A<\/strong>) Nonembryogenic callus were induced on MS medium with 2.26 μm<\/span> 2,4-D. (B<\/strong>) Embryogenic callus were induced on MS medium with 11.31 μm<\/span> 2,4-D. (C<\/strong>) Scutellar stage of embryos were induced on PGR-free MS medium with 3% sucrose (arrows). (D<\/strong>) Clusters of scutellar embryos. (E<\/strong>) Primary root developed from radicle on full strength MS medium (arrows). (F<\/strong>) Coleoptile developed within another week (arrows). (G<\/strong>) Leaf emerged from coleoptile (arrows). (H<\/strong>) Regenerated plantlets with well-developed leaves and roots. (I<\/strong>) Accilimatized plantlets in the greenhouse. MS = Murashige and Skoog\u2019s; 2,4-D = 2,4-dichloropheoxyacetic acid; PGR = plant growth regulator; S = scutellum; R = root; Cp = cleoptile; L = leaf. Bars = A\u2013G = 1 mm; H\u2013I = 1 cm.<\/p><\/caption>"}]}" aria-selected="false" role="option" data-menu-item="list-id-168e1558-4e7b-4db6-8ffe-a7fa02583f65" class="ListItem ListItem--disableGutters ListItem--divider">

    在画廊

    茎尖的体细胞胚发生虹膜蠊.(一个非胚性愈伤组织在MS + 2.26 μ2,4 - d。(B胚性愈伤组织在MS + 11.31 μ2,4 - d。(C)在无pgr的MS培养基(含3%蔗糖)上诱导黄芩胚期(箭头)。(D鳞片状胚胎簇。(E初生根在MS培养基(箭头)上从胚根发育而来。(F胚芽鞘在另一个星期内发育(箭头)。(G)叶子从胚芽鞘(箭头)中出现。(H)具有发育良好的叶和根的再生植株。(温室里驯化的植株。MS = Murashige and Skoog 's;2,4-d = 2,4-二氯氧乙酸;植物生长调节剂;S =角质鳞片;R =根;Cp = cleoptile;L =叶。棒= A-G = 1 mm;H-I = 1 cm。

  • Effect of medium on the germination and conversion of somatic embryos (A<\/strong>) and the growth of plantlets (B<\/strong>) of Iris germanica<\/em>. Vertical bars represent the standard error of the mean. Different letters indicate significantly differences by Duncan\u2019s multiple range test (P<\/em> < 0.05); n<\/em> = 50 per explant.<\/p><\/caption>"}]}" aria-selected="false" role="option" data-menu-item="list-id-168e1558-4e7b-4db6-8ffe-a7fa02583f65" class="ListItem ListItem--disableGutters ListItem--divider">

    在画廊

    培养基对细胞胚胎萌发和转化的影响(一个)及植株的生长(B)虹膜蠊.竖条表示平均值的标准误差。不同字母表示邓肯多重范围测验有显著差异(P< 0.05);n=每外植体50块。

  • Histological sections of embryogenic calli and somatic embryos of Iris germanica<\/em>. (A<\/strong>) The cells of embryogenic callus with dense cytoplasm and conspicuous nucleus (arrow). (B<\/strong>) The protuberance on the embryogenic callus (arrow). (C<\/strong>) Globular somatic embryo developed on the surface of embryogenic callus (arrow). (D<\/strong>) Torpedo somatic embryo developed on the surface of embryogenic callus. (E<\/strong>) Globular somatic embryo developed from the inner tissue of embryogenic callus (arrow). (F<\/strong>) Torpedo somatic embryo developed from the inner tissue of embryogenic callus (arrow). Ec = embryogenic callus; Ge = globular embryo; P = protuberance; Te = torpedo embryo. Bars = 100 μm.<\/p><\/caption>"}]}" aria-selected="false" role="option" data-menu-item="list-id-168e1558-4e7b-4db6-8ffe-a7fa02583f65" class="ListItem ListItem--disableGutters ListItem--divider">

    在画廊

    胚性愈伤组织和体细胞胚的组织学切片虹膜蠊.(一个)胚性愈伤组织细胞,细胞质致密,细胞核明显(箭头)。(B)胚性愈伤组织(箭头)上的突起。(C)胚性愈伤组织表面发育球状体胚(箭头)。(D鱼雷体细胞胚发育于胚性愈伤组织表面。(E)胚性愈伤组织内部组织发育的球状体胚(箭头)。(F鱼雷体细胞胚由胚性愈伤组织内部组织发育而来(箭头)。Ec =胚性愈伤组织;Ge =球形胚;P =突起;鱼雷胚胎。柱= 100 μm。

  • Ammirato,P.V.1974脱落酸对香菜体细胞胚发育的影响Carum carvil .)机器人。Gaz。135328337

  • Bano,Z。Rajarathnam,年代。莫汉蒂,最初1991茶树子叶培养的体细胞胚胎发生(制成l .)j .长的矮。科学。66465470

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Biahoua,一个。邦,l1999的控制在体外梭形树的体细胞胚胎发生(卫矛europaeusL.)通过糖型和培养基的渗透潜力植物细胞Rpt。19185190

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 陈,R。张,M。陆,J。张,X。达席尔瓦,J.A.T.嘛,G。2014年叶外植体的茎器官发生和体胚发生缬草jatamansi琼斯科学。长的矮。165392397

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 富恩特斯,狭义相对论卡列罗斯,M.B.Manetti-Filho,J。维埃拉,低速齿轮2000年硝酸银和不同碳水化合物来源对紫花苜蓿体细胞胚胎发生的影响Coffea Canephora.植物细胞组织器官邪教。60513

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Gozu,Y。YokoyamaM。Nakamura,M。Namba,R。Yomogida,K。昭,M。Nakamura,年代。1993离体繁殖虹膜pallida植物细胞代表。131216

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 汉,Y.L.黄,S.Z.元,H.Y.赵,J.Z.顾,j。2013年有机酸对生长,解剖结构,生化参数和重金属积累虹膜lacteavar。在Pb矿尾矿中生长幼苗生态毒理学2210331042

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 哈特曼,高强度科斯特,D.E.戴维斯J.F.T.日内瓦,R.L.1997植物繁殖、原理与实践。第六版,普伦蒂斯霍尔,新泽西州

  • 黄,S.Z.汉,Y.L.谢,'郭先生,波长计顾,Y。2003年,一个中国观赏鸢尾资源的研究与开发中国野生植物资源2247(在中国)

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 黄,S.Z.汉,Y.L.俞,S.L.顾,j。张,l。2011年铅、铜对水花生长及生理反应的影响虹膜pseudacorusl费森尤斯公司环境。小羊。20.2246.2250.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 黄,S.Z.汉,Y.L.张,Y.G.郭先生,波长计2003 b矮生植物的培育虹膜蠊l通过杂交j .南京Agr。大学。262125(在中国)

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 接过话头,H。礼貌的,D。Ehret,C。我们针对,K。Petiard,V。1994植物的再生虹膜pallida林。和虹膜蠊叶片、顶端和幼花的体细胞胚发生植物细胞Rpt。13671675

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Jeknic,Z。李,……戴维斯J。恩斯特,陈,T.H.1999遗传转化的虹膜蠊根癌土壤杆菌j·阿。Soc。长的矮。科学。124575580

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Jevremović,年代。Radojević,剩下2006年高效叶片外植体再生方案的建立虹膜pumila芽培养在体外科学。长的矮。108One hundred.103

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Karami,O。Deljou,一个。Esna-Ashari,M。Ostad-Ahmadi,P。2006年蔗糖浓度对香石竹体胚发生的影响Dianthus Caryophyllus.l .)科学。长的矮。110340344

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 金,T.D.安,h英国宇航系统公司,K.H.Y.E.2009年体细胞胚发生过程中胚发生能力和形态的变化虹膜pseudacorus植物生物科技。RPT。3.251257

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Laublin,G。赛,H.S.卡帕多西亚,M。1991在体外一些根茎鸢尾根培养的体细胞胚胎发生再生植株植物细胞组织器官邪教。271521

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Limanton-Grevet,一个。Jullien,M。2000年体细胞胚胎发生在芦笋officinalis.可以是An.在体外选择过程导致习惯和2,4 - d依赖胚胎发生系植物杂志。物化学。38567576

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 绞合线,镭射气1986渗透胁迫对水稻体细胞胚胎发生的影响Carica悬挂的文化j·阿。Soc。长的矮。科学。111969972.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 卢,H。玉城丹尼,M。Kako,年代。1996蔗糖浓度的影响在体外培养黄瓜子叶外植体的形态发生j .长的矮。科学。71497502.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Manrique-Trujillo,年代。迪亚兹,D。Reano,R。芬兰,M。Kreuze,J。2013年通过改进的体细胞胚胎发生程序甘薯植株再生科学。长的矮。16195One hundred.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Murashige,T。斯,F。1962烟草组织培养快速生长和生物测定的修正培养基physiol。植物。15473497

  • 中川昭一,H。Saijyo,T。山内,N。Shigyo,M。Kako,年代。伊藤一个。2001年糖和脱落酸对甜瓜体细胞胚胎发生的影响Cucumis梅洛l .)扩大子叶科学。长的矮。908592

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 普拉多博物馆,E。Berville,一个。1990向日葵液体培养诱导体胚发育的研究(Helianthus Annuus.l .)植物科学。677382

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Radojević,剩下Sokić,O。Tucić,B。1987鸢尾组织培养的体细胞胚胎发生(虹膜pumilal .)Acta长的矮。212719.723.

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • Radojević,lsubotić,一个。1992植物的再生虹膜setosa棺罩。通过体细胞胚胎发生和器官发生j .植物杂志。139690696

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 鲁瑟,G。1977不同胚种为加顿胚种虹膜und.芦笋的误码率。Dtsch。机器人。全球经济。90417437

  • Shibli,R.A.ajlouni,M.M.2000年特有黑鸢尾的体细胞胚胎发生植物细胞组织器官邪教。611521

  • 特里夏M。1932研究细胞学和遗传学虹膜.éditiondu Bulletin Bioligique de la France et de la Belgique 66:255-444

  • 加拿大,F.M.1990从贮藏的种子中分离出的胚体胚胎发生和植株再生云杉glauca可以。j .机器人。68236242

    • 搜索Google Scholar.
    • 出口的引用
  • 齐默尔曼,评论1993体细胞胚胎发生:高等植物早期发育的一个模式植物细胞51411

所有的时间 过去的一年 过去30天
抽象的观点 0 0 0
全文视图 391 80 14
PDF下载 131 45 15